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來看看專業(yè)的人員是如何使用細(xì)胞計數(shù)片做實驗的

更新時間:2021-07-01點擊次數(shù):1397

    細(xì)胞計數(shù)片是一塊特制的厚型載玻片,載玻片上有四個槽構(gòu)成三個平臺。中間的平臺較寬,其中間又被一短橫槽分隔成兩半,每個半邊上面各刻有一小方格網(wǎng),每個方格網(wǎng)共分九個大格,中央的一大格作為計數(shù)用,稱為計數(shù)區(qū)。計數(shù)區(qū)的刻度有兩種:一種是計數(shù)區(qū)分為16個大方格(大方格用三線隔開),而每個大方格又分成25個小方格;另一種是一個計數(shù)區(qū)分成25個大方格(大方格之間用雙線分開),而每個大方格又分成16個小方格。但是不管計數(shù)區(qū)是哪一種構(gòu)造,它們都有一個共同特點,即計數(shù)區(qū)都由400個小方格組成。

    細(xì)胞計數(shù)片實驗原理:當(dāng)待測細(xì)胞懸液中細(xì)胞均勻分布時,通過測定一定體積懸液中的細(xì)胞的數(shù)目,即可換算出每毫升細(xì)胞懸液中細(xì)胞的細(xì)胞數(shù)目。

    細(xì)胞計數(shù)片的具體操作:

    1. 將計數(shù)板及蓋片擦拭干凈,并將蓋片蓋在計數(shù)板。

    2. 將細(xì)胞懸液吸出少許,滴加在蓋片邊緣,使懸液充滿蓋片和計數(shù)板之間,靜置3min,注意蓋片下不要有氣泡,也不能讓懸液流入旁邊槽中。

    3. 計算板四大格細(xì)胞總數(shù),壓線細(xì)胞只計左側(cè)和上方的。然后按公式計算:細(xì)胞數(shù)/mL=四大格細(xì)胞總數(shù)/4×104,說明:公式中除以4,因為計數(shù)了4個大格的細(xì)胞數(shù)。

    公式中乘以104因為計數(shù)板中每一個大格的體積為:1.0mm(長)×1.0mm(寬)×0.1mm(高)=0.1mm3而1ml=1000mm3(注意:鏡下偶見有兩個以上細(xì)胞組成的細(xì)胞團(tuán),應(yīng)按單個細(xì)胞計算,若細(xì)胞團(tuán)10%以上,說明分散不好,需重新制備細(xì)胞懸液)。
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